​1、服务器和客户机的概念

• 谁提供服务，谁是服务器；谁请求服务，谁是客户机
• 可以自己向自己请求服务，也可以自己向自己提供服务

2、OSI参考模型

1.分层的好处

• 数据通讯每个环节的变化不影响其他环节
• 有利于各厂商的设备标准化

2.各层概述

• 应用层（Application）—— 能够产生网络流量的网络应用程序。例如：QQ，IE等，计算器之类则不属于应用层。
• 表示层（Presentation）—— 加密、压缩、二进制等。IE编码选择错误导致轮吗就属于表示层错误。
• 会话层（Session）—— 网络会话进程，可用netstat –n –nb 查看
• 传输层（Transport Layer） —— 可靠传输（TCP），不可靠传输（UDP），流量控制，滑动窗口技术
• 网络层（Network Layer）—— 选择路径
• 链路层（Date Link）—— 定义了如何标识网络设备
• 物理层（Physical）—— 电压，接口等

3.从排错角度看OSI参考模型

• 从底层往高层逐一排错
• 物理层故障：连接错误
• 链路层故障：ARP病毒，ADSL拨号，
• 网络层故障：选择路径上出了问题，例如无网关，无路由等
• 传输层故障：
• 会话层故障：
• 表示层故障：例如IE编码错误等
• 应用层故障：IE插件等

4.从安全角度看OSI参考模型

• 物理层安全：多余接口，机房门禁等。
• 链路层安全：交换机端口绑定MAC地址等
• 网络层安全：IP访问控制列表等
• 应用层上三层安全：杀毒软件，应用层防火墙等

3、网络设计的三层模型

• 接入层交换机：直接连接终端的交换机，一般接口多，带宽相对较低
• 汇聚层交换机：连接接入层的交换机，带宽相对较高
• 核心层交换机：连接汇聚层的交换机，转发速度快

4、网络设备

1.集线器（Hub）：带冲突检测的载波侦听多路访问（CSMA/CD）

• 不安全，数据靠广播传输
• 效率低，一个（多个）集线器是一个冲突域，共享带宽

2.网桥（Bridge）

• MAC地址学习
• 隔离冲突域

3.交换机（Switch）

• 安全，数据根据Mac地址表转发
• 效率高，一个端口是一个冲突域，每个端口带宽不受其他端口影响
• 一个（多个）交换机是一个广播域

4.路由器（Routor）

• 基于IP地址转发
• 广域网接口
• 隔离广播域
• ACL

5.网线

• 交叉线：连接同类设备
• 直通线：连接不同设备
• 全反线：连接Console口
• 100M用4根，1000兆用8根（大多数设备，具体还要看规范）

5、半双工和全双工以太网

• 半双工：不能同时收发，例如HUB网络
• 全双工：可以同时收发，例如交换机网络

6、TCP/IP协议

• 应用层（Application Layer）：对应OSI的应用层、表示层、会话层。相应协议HTTP、FTP、SMTP等
• 传输层（Transport Layer）：对应OSI的传输层。相应协议TCP、UDP等（小数据，广播组播等常用不可靠传输）
• Internet Layer：对应OSI的网络层。相应协议IP、ICMP、IGMP、ARP等
• 网络接入层（Network Interface Layer）：对应OSI的数据链路层和物理层。相应协议ATM、Ethernet等
• 应用层协议与传输层协议的关系：HTTP=TCP+80；FTP=TCP+20/21；SMTP=TCP+25；POP3=TCP+10；RDP=TCP+3389；数据库=TCP+1143；DNS=UDP or TCP +53；
• 自主开发应用层软件要使用1024以后的端口号
• 端口号的作用是标识提供的服务，不同服务应该使用不同端口，默认端口可以更改，但客户端必须同步更改。netstat –a –an 可查看端口状态，telnet 远程主机IP 端口号 可以查看远程服务器的端口是否打开。
• 可以在网卡属性->IPV4->高级->选项，设定只开放指定端口。
• 开启Windows防火墙保护客户端安全。只能防止外部连接，无法阻止内部连接，无法防止木马
• 可以通过先建立连接，再使用netstat命令的方法来查看应用程序使用的TCP端口。
• 使用IPSec防止木马，路由器使用IP访问控制，联系更改远程访问服务端口号

7、网络层协议

• RIP（Routing information Protocol-路由信息协议）
• EIGRP（Enhanced Interior Gateway Routing Protocol-增强内部网关路由线路协议）
• OSPF（Open Shortest Path First-开放最短路径优先）
• ICMP（Internet Control Message Protocol-Internet控制报文协议）；测试网络连通性 ping、pathping、tracert（路由器上使用）
• IGMP（Internet Group Management Protocol-Internet 组管理协议）；组播管理
• ARP（Address Resolution Protocol-地址解析协议）；IP地址转变为MAC地址，广播
• 数据段、数据包、数据帧的区别
• 抓包工具wireshark

8、常规排查方法

• IPconfig；查看是否获取到正确的IP地址
• Ping 127.0.0.1；确定网卡驱动程序，TCP/IP协议是否安装正确
• Ping网关；确定局域网是否畅通（注意ARP病毒）
• Ping 公网地址；确定与外网链接是否畅通
• Ping 公网域名；确定DNS域名解析是否正常
• Telnet 公网网址 80端口；确认应用层服务是否工作正常
• 检查IE设置；确认应用层客户端软件问题
• 替换法；疑似软硬件问题

9、IP地址（IPV4)

• A类；0-127，前8位主机位
• B类；128-191，前16位主机位
• C类；192-223，前24位主机位
• D类；224-239，多播地址，无子网掩码
• E类；240-255，用于测试
• 主机位全0表示此网段，全1为本地广播，不能做主机地址
• 私有地址；10.0.0.0/8，172.16.0.0/16~172.31.0.0/16，192.168.0.0/24~192.168.255.0/24，169.254.0.0/16（微软预留），127.0.0.1（本机环回）
• 地址转换（NAT）；端口映射
• 变长子网掩码（Variable-Length Subnet Mask----VLSM）

10、路由器

1.路由器硬件结构

• RAM；存放当前运行配置
• NVRAM；存放已保存的配置
• ROM；Bootstrap引导程序、POST（加电自检程序）、Mini IOS、ROM monitor
• Flash；存放IOS
• 端口；以太网口、串口、Console口、AUX口等
• 路由器加电/启动顺序；加电自检（POST）-加载并执行引导程序（Bootstarp）-寻找映像文件（Flash）-加载映像文件（RAM）-寻找配置文件（NVRAM）-加载配置文件（RAM）-正常运行

2.配置寄存器的值

• 查看寄存器的值；Router#show version命令 显示内容最后一行“Configuration register is 0x2102”
• 修改寄存器的值；Router(config)#config-register 0x2102 正常方法

3.MiniIos（故障恢复模式）

• 如何进入；启动时按ctrl + break可进入
• 修改寄存器的值；rommon 2 > confreg 0x2142（修改寄存器值为0x2142；此模式命令无法自动补全）
• 重启路由器；rommon 3 > reset

4.恢复路由器密码

• 进入MiniIos；启动时按ctrl + break
• 修改寄存器的值；rommon 2 > confreg 0x2142
• 重启路由器；rommon 3 > reset
• 调入配置文件；Router#copy startup-config running-config
• 修改或清除遗忘的密码；
• 保存配置；Router#write
• 修改寄存器的值；Router(config)#config-register 0x2102
• 重启路由器；Router#reload （可省略）

5.重新安装、备份和升级路由器

• 基本命令

a)查看Flash中的IOS 文件；Router#show flash

b)删除Flash中的IOS文件；Router#delete flash: 回车Delete filename []?c2600-i-mz.122-28.bin（删除操作系统后，重启时会直接进入MiniIos）

c)从TFTP服务器复制文件

1)指定从TFTP复制文件；Router#copy tftp: flash:

2)指定服务器IP地址；Address or name of remote host []? 192.168.1.1

3)指定目标文件名；Source filename []? c2600-i-mz.122-28.bin

4)回车，确认。完成复制

d)从FTP服务器复制文件

1)设定FTP用户名；Router(config)#ip ftp username cisco

2)设定FTP密码；Router(config)#ip ftp password cisco

3)指定从FTP复制文件；Router#copy ftp: flash:

4)指定服务器IP地址；Address or name of remote host []? 192.168.1.1

5)指定目标文件名；Source filename []?
c2600-ipbasek9-mz.124-8.bin

6)回车，确认。完成复制

• ii.升级路由器

a)删除旧IOS文件

b)复制新IOS文件

c)重启路由器，升级成功

• iii.备份路由器

a)复制IOS文件至FTP或TFTP服务器

b)备份成功

• iv.重新安装路由器

a)方法一

1)连接TFTP服务器到路由器第一以太网口

2)连接PC串口至路由器Console口（可与TFTP服务器为同一台机器）

3)打开路由器进入MiniIos

4)设定路由器IP地址；rommon 2 > IP_ADDRESS=192.168.1.254

5)设定路由器子网掩码；IP_SUBNET_MASK=255.255.255.0

6)设定路由器网关；DEFAULT_GATEWAY=192.168.1.1

7)设定TFTP服务器地址；TFTP_SERVER=192.168.1.1

8)指定IOS映像文件名；rommon 6 > TFTP_FILE=
c2900-universalk9-mz.SPA.151- 4.M4.bin

9)回车确定即可完成

b)方法二

1)复制相应映像文件至PC

2)通过Console口连接PC和路由

3)选择通过Xmoden协议传输映像文件；rommon 2 > xmodem

4)回车，确认后路由器处在等待接收状态

5)在PC超级终端中使用Xmoden传输文件

6)等待很长时间后，完成。（可通过更改传输速率缩短时间）

6.路由器IOS功能

• 加载网络协议
• 在不同网段转发数据
• Acl流量控制
• 可靠的服务
• 可扩展

7.配置路由器的方法

• Console口
• Telnet

8.启动路由器

• Post加载IOS配置文件

9.常用命令

• Router>enable 进入特权模式
• Router#disable 退出特权模式
• Router#exit 退回上一级模式
• Router#end 直接退回特权模式
• Router#show interfaces 查看所有接口（后接指定端口可单独查看）
• Router#show running-config 查看当前配置、密码、接口IP地址、ACL、NAT
• Router#show startup-config 查看闪存配置
• Router#show version 查看路由器版本信息、配置寄存器的值
• Router#show ip interface 查看和IP相关的接口信息
• Router#show ip route 查看路由表
• Router#show ip protocols 查看路由器运行的动态路由协议
• Router#copy running-config startup-config 或 Router#write 保存当前配置
• Router#ping 192.168.1.1 测试与其他设备的连接是否成功
• Router#telnet 192.168.1.1 远程连接其他设备
• Router #traceroute 192.168.1.1 路由跟踪命令
• Router (config)#ip host R1 192.168.4.1 记录主机名DNS记录（类似hosts文件）
• Router#configure terminal进入全局配置模式
• Router(config)#no ip domain-lookup 取消自动域名解析
• Router(config)#hostname R1更改设备名称为“R1”
• Router(config)#enable password cisco 设置特权模式密码为“cisco”（未配置特权密码的情况下，Telnet远程只能进入用户模式）
• Router(config)#enable secret Cisco设置加密的特权模式密码为“Cisco”，明文密码与加密密码同时存在的情况下，有效密码为加密密码。
• Router(config)#service password-encryption 加密所有密码（无法通过no还原）
• Router(config)# ip classless 启用默认路由
• Router(config)#line vty 0 4 配置默认虚拟接口（Telnet默认端口为TCP 23）
• Router(config-line)#login设定远程连接必须登录（默认设置），不设置密码时等同关闭线路
• Router(config-line)#password Cisco 设定远程登录密码为“Cisco”
• Router(config)#interface f0/0 进入F0/0端口配置模式
• Router(config-if)#ip address 192.168.0.1 255.255.255.0 为端口配置IP地址和子网掩码
• Router(config-if)#no shutdown 打开端口
• Router(config-if)#ip address 192.168.0.1 255.255.255.0 secondary 配置第二个地址（PT模拟器不支持）
• Router(config)#interface serial 0/0 进入串口 S0/0 端口配置模式
• Router(config-if)#clock rate 64000 配置时钟频率（只有DCE端需要配置）

11、Cisco发现协议（CDP：Cisco Discovery protocol）

1. 基于二层，与IP无关
2. 60秒发一次，Holdtime 180秒
3. 常用命令：

• 查看CDP全局设置；Router#show cdp
• 查看CDP邻居信息；Router#show cdp neighbors
• 查看CDP详细信息；Router#show cdp entry 或者Router #show cdp neighbors detail
• 查看本机接口CDP信息；Router#show cdp interface
• 查看CDP广播统计；Router #show cdp traffic
• 开启所有端口的CDP协议；Router (config)#cdp run
• 设定广播周期；Router (config)#cdp timer 60
• 设定Holdtime；Router (config)#cdp holdtime 180
• 开启指定端口CDP协议：Router (config-if)#cdp enable

12、路由

1.路由

• 不同网段间的数据转发
• 查看路由表；Router #show ip route

2.静态路由

• 管理员手工添加路由表
• 添加静态路由；Router (config)#ip route 192.168.1.0 255.255.255.0 192.168.4.1

3.动态路由

• 路由器自动学习路由表

4.路由汇总

• 把一组路由汇聚为一个单个的路由广播
• 缩小网络上的路由表的尺寸
• 减少与每一个路由跳有关的延迟

5.默认路由

• 是对IP数据包中的目的地址找不到存在的其他路由时，路由器所选择的路由

6.路由协议分类

• 按自治系统内部外部区分

1.自治系统：使用相同的路由准则的网络的集合

2.IGPs(内部网关协议/Interior Gateway Protocol）；自治系统内部使用，常用 有RIP、EIGRP、OSPF等

3.EGPs（外部网关协议/Exterior Gateway Protocol）；自治系统之间使用，先 多用BGP协议

• 按路由协议算法分类

1.距离矢量（Distance Vector）；RIP、IGRP

2.链路状态（Link State）；OSPF

3.混合路由（高级距离矢量Advanced Distance Vector）；EIGRP

7.衡量路由协议的性能指标

• 正确性；能够正确找到最优的路由，且无环路
• 快收敛；当网络的拓扑结构发生变化后，能够迅速在自治系统中做出相应的改变
• 低开小；协议自身的开销（内存、CPU、网络带宽）小
• 安全性；协议自身不易受到攻击，有安全机制
• 普适性；适应各种拓扑结构和规模的网络

8.常用路由的管理距离（Cisco设备中）

• 直连路由；0
• 静态路由；0（自身端口）或者1（下一跳IP）
• EIGRP汇总路由；5
• RIP；120
• OSPF；110
• EIGRP；90

9.常用路由的管理距离（华为设备中）

• 直连路由；0
• OSPF；10
• 静态路由；60
• IGRP；80
• RIP；110
• O_ASE；150
• BGP；170

13、距离矢量路由协议

1.工作原理

• 周期性广播路由表
• 路由器从收集到的源信息中选择到达目标地址的最佳路径（度量值为跳数）
• 路由表的更新过程将通过路由器之间一步一步来完成

2.产生的问题

• 路由回环
• 无限计数

3.解决办法

• 定义最大跳数；可解决无限计数及路由回环问题，但限制了网络规模
• 水平分割；不会接收到由自身传达出去的路由信息，可解决直连路由间的路由回环问题
• 路由毒杀；将故障路由信息的跳数标记为无限大（16），Hold Down时间到达后丢弃此条路由信息，可解决因路由表不同步而造成的回环
• 反转毒杀；反转毒杀可以无视水平分割的原则
• 触发更新；当路由表发生变化时路由器立即发送更新信息

14、链路状态路由协议

1. 工作原理

• 路由器找到自己的邻居
• 每个路由器向邻居发送LSA（链路状态通告/link state advertisement）数据包，包含了自己的路径成本
• LSA扩散，每个路由器得到相同的拓扑结构的数据库
• 由SPF（最短路径优先/ Shortest Path First）算法计算网络可达性，建立SPF树，以自己为树根
• 创建路由表，列出最优路径列表；维护其他拓扑结构和状态细节数据库

15、混合路由协议

• 高级距离矢量路由协议
• 通过传递变化的更新信息达到快速收敛

16、路由协议配置任务

• 启动路由协议；Router(config)#router protocol [keyword]
• 宣告网络或端口；Router(config-router)#network network-number
• 注意，EGP/BGP协议宣告的是路由信息而不是网络或端口

17、RIP路由协议；属于距离矢量类协议

1.周期；默认30秒

2.度量值；最大跳数15条

3.最多支持相同跳数的6条路径（默认为4条）

4.RIPv1；广播路由信息，支持等长子网，不支持变长子网和不连续子网

5.RIPv2；多播路由信息，支持变长子网和不连续子网（关闭自动路由汇总）

6.开放式路由协议，各个品牌路由器基本都支持

7.常用命令：

• 启用RIP协议；Router (config)#router rip
• 宣告网络；Router (config-router)#network 192.168.3.0
• 更改为V2版本；Router (config-router)#version 2
• 关闭自动路由汇总；Router (config-router)#no auto-summary
• 调试；Router#debug ip rip

18、有类路由协议

• 类边界自动路由汇总
• 类边界为A，B，C的概念

19、EIGRP（增强内部网关路由线路协议）

属于高级距离矢量协议（混合路由），Cisco私有协议

• 周期更新路由信息；默认90秒
• 度量值；默认为带宽+延迟（负载、可靠性、最大传输单元）
• 支持大型网络；默认100跳，最大支持255跳（必须在同一自治系统）
• 支持变长子网和不连续子网（关闭自动汇总）
• 收敛速度快；有备用路径
• 常用命令
• 启用RIGRP协议；Router(config)#router eigrp 90
• 宣告网络；Router (config-router)#network 192.168.3.0 [0.0.0.255]

20、VLAN（Virtual local Area Network)虚拟局域网

1.目的

• 控制广播
• 安全

2.适用情况

• 当一个交换机上的所有端口中有至少一个端口属于不同网段的时候
• 当路由器的一个物理端口要连接2个或者以上的网段的时候

3.TRUNK

• 可传输不同VLAN的数据
• 出交换机加VLAN标签，入交换机去标签

4.常用命令

• 查看VLAN；Switch#show vlan
• 创建一个VLAN；Switch(config)#vlan 2
• 进入端口组；Switch(config)#interface range fastEthernet 0/11 – 24
• 向VLAN添加端口；Switch(config-if-range)#switchport access vlan 2
• 设定TRUNK端口；Switch(config-if)#switchport mode trunk
• 单臂路由命令
• 进入子接口；Router(config)#interface gigabitEthernet 4/0.1
• 指定VLAN号；Router(config-subif)#encapsulation dot1Q 1
• 注意点

a)主接口只需要开启，无需配置IP地址阿斯顿噶额度发生地发呆所发生的发的说法是打发第三方奥德赛法第三方

b)子接口只需要配置IP地址，无需开启

c)需要先指定VLAN号，再配置子接口IP

• .三层交换机命令
• 1.进入VLAN端口；Switch(config)#interface vlan 2
• 2.注意点

a)需要先添加VLAN才能进行接口配置

b)IP地址在VLAN接口中配置

c)VLAN端口需要开启

d)连接三层交换的端口并不一定需要配置为TRUNK

e)一次路由，多次转发（硬件转发）

• VTP （VLAN Trunking Protocol）虚拟局域网干道协议
• 1.相关知识

a)是一个OSI参考模型第二层的通信协议

b)主要用于管理在同一个域的网络范围内VLANs的建立、删除和重命名

c)VLAN管理域；是一组VTP域名相同并通过中继链路相互连接的交换机

• 2.VTP管理域的要求

a)域内的每台交换机都必须使用相同的域名，不论是通过配置实现，还是由交换自动学到的

b)Catalyst交换机必须是相邻的，即相邻的交换机需要具有相同的域名

c)在所有Catalyst交换机之间，必须配置中继链路

• 3.VTP模式

a)服务器模式（Server）；默认模式

i.提供VTP消息：包括VLAN ID和名字信息

ii.学习相同域名的VTP消息

iii.转发相同域名的VTP消息

iv.可以添加、删除和更改VLAN VLAN信息写入NVRAM

b)客户机模式（Client）

i.请求VTP消息

ii.学习相同域名的VTP消息

iii.转发相同域名的VTP消息

iv.不可以添加、删除和更改VLAN VLAN信息不会写入NVRAM

c)透明模式（Transparent）

i.不提供VTP消息

ii.不学习VTP消息

iii.转发VTP消息

iv.可以添加、删除和更改VLAN，只在本地有效 VLAN信息写入NVRAM

• 4.常用命令

a)设定VTP管理域；Switch(config)#vtp domain cisco

b)设定VTP域密码；Switch(config)#vtp password 123

c)设定为VTP客户端模式；Switch(config)#vtp mode client

d)设定为VTP服务器模式；Switch(config)#vtp mode server

e)设定为VTP透明模式；Switch(config)#vtp mode transparent

21、网络层安全ACL(Access Control List)

1.IP访问控制列表的作用

• 流量控制
• 过滤数据包

2.类别

• 标准访问控制列表；基于源IP地址过滤数据
• 扩展访问控制列表；基于源IP地址、目标IP地址、协议（TCP/UDP/ICMP等）、目标端口来过滤数据

3.常用命令

• 查看访问控制列表；Router#show access-lists
• 建立标准访问控制列表；Router(config)#access-list 10 deny 192.168.2.2 0.0.0.0
• 建立扩展访问控制列表；Router(config)#access-list 110 permit tcp 192.168.2.0 0.0.0.255 host 10.0.0.2 eq 80
• 将访问控制列表应用到端口；Router(config-if)#ip access-group 10 out
• 将访问控制列表应用到VTY端口；Router(config-line)#access-class 10 in

4.注意点

• 默认标准ACL编号为1-99，扩展编号为100-199
• ACL使用反子网掩码
• 先建立访问控制列表，进入端口配置后，再应用到端口出或入
• 访问控制列表的顺序按照输入先后排列
• 访问控制列表的匹配按照先后顺序，匹配一条后不再向下检验
• 默认为禁止所有
• 无法删除单独的访问控制列表条目，只能删除整个列表（PT中可进入列表配置单独删除一行，但不能调整顺序，不知真机可否）。
• 1.进入列表配置模式；Router(config)#ip access-list standard 10
• 2.删除某条目；Router(config-std-nacl)#no permit any

22、NAT(Network Address Translation,网络地址转换）

1.静态地址转换

• 地址转换命令；Router(config)# ip nat inside source static 10.1.1.1 172.16.12.10
• 设定内部端口；Router (config-if)#ip nat inside
• 设定外部端口；Router (config-if)#ip nat outside

2.动态地址转换

• 配置外部地址池；Router(config)#ip nat pool chris 172.16.12.100 172.16.12.150 netmask 255.255.255.0
• 配置ACL（需要转换的内部地址范围）；Router(config)#access-list 1 permit 10.1.1.0 0.0.0.255
• 地址转换命令；Router(config)#ip nat inside source list 1 pool chris
• 设定内部端口；Router (config-if)#ip nat inside
• 设定外部端口；Router (config-if)#ip nat outside

3.端口地址转换

• 配置外部地址池；Router(config)#ip nat pool chris 172.16.12.10 172.16.12.10 netmask 255.255.255.0
• 配置ACL（需要转换的内部地址范围）；Router(config)#access-list 1 permit 10.1.1.0 0.0.0.255
• 地址转换命令；Router(config)#ip nat inside source list 1 pool chris overload
• 设定内部端口；Router (config-if)#ip nat inside
• 设定外部端口；Router (config-if)#ip nat outside

4.端口映射

• 地址转换命令；Router(config)ip nat inside source static tcp 192.168.1.100 23 10.0.0.1 5631 extendable
• 设定内部端口；Router (config-if)#ip nat inside
• 设定外部端口；Router (config-if)#ip nat outside

5.常用命令

• 查看地址转换表；Router(config)#show ip nat translations
• 清除地址转换表；Router(config)#clear ip nat translations *
• 调试NAT；Router(config)#debug ip nat

6.注意点

• 端口地址转换与动态地址转换配置基本相同，主要区别在于配置时是否加上“overload”
• 静态地址转换无需配置内部地址范围及外部地址池
• 动态地址转换当内部地址少于外部地址时，可能需要手动清除地址转换表才能正常访问

 

 

汤之《盘铭》曰：“苟日新，日日新，又日新。”

句文译“商汤王刻在洗澡盆上的箴言——如果能够一天新，就应保持天天新，新了还要更新。”

最近流行的一句话是：时代抛弃你时，连一声再见都不会说。

在灾备行业市场，英方从未敢停下歇息的脚步。在完善技术方案和满足用户定制需求时，英方持续对技术研发进行投入，去年在北京、上海研发中心的基础上，又新设立了杭州研发中心，以i2Share为产品方案阵容，为用户提供更多数据云端管理的选择。然而，技术上的不断创新拓展的同时，区域灾备市场的深耕并未止步，比如英方在河北石家庄的灾备服务，也在不断推陈出新。

今天，英方时隔一年又一次成功举办了石家庄合作伙伴价值峰会，我们的选择和坚守，不仅成就了英方在河北地区的业绩的快速高质量增长，也不断丰富了合作伙伴的业务范畴和人才储备。

➤ 赵丽荣，英方华北区销售总监，《“冀”往开来，再赢云端》

英方在河北地区的持续深耕和拓展，源自于英方拥有成熟稳定的灾备全生态产品版图，这些受到业界好评的技术方案涵盖了从数据存储——数据灾备——数据应用和分享的数据流动方向。在介绍英方公司及技术优势之后，英方华北区销售总监赵丽荣介绍了英方的核心软件产品。

齐全的灾备产品，是为了不断出新以满足用户的应用场景。在具体的应用中，英方目前通过“灾备一体机、解决方案、工具”三位一体的产品应用，满足各类规模、各个行业的用户需求。

赵丽荣表示：“这些完备的产品方案，需要区域的合作伙伴与英方共同努力推进，以便更好地服务区域的用户。”对此，她详细介绍了合作伙伴支持体系，在去年政策市场的体系下，今年英方在人才培养方面投入更多资源，包括线上培训和实地培训，加强合作伙伴灾备人才队伍的培养，同时也是想通过不断创新区域合作伙伴的合作内容，让双方的合作更加紧密，在河北地区实现“冀往开来，再赢云端”的目的。

目前，英方全国工程师认证分i2Certification STD和i2Certification ADV两个级别。

➤ 默陶英，英方华北区销售经理，《英方渠道政策及案例分享》

合作政策是地区合作伙伴最需要了解的内容。在去年的政策基础上，今年，英方增加了新的渠道政策，其中在一级渠道体系中，英方合作伙伴划分为四个方面，分别是全国总分销、区域总分销/技术服务商、英方云分销商和英方战略合作伙伴，并建立完善的报备制度和奖励措施。

作为服务河北地区的销售经理，默陶英在介绍完渠道政策时，分享了英方在河北地区的几个典型案例，包括河北省财政厅案例（同城异地灾备）、河北省公安消防总队容灾案例（数据集中异地灾备）、保定第三中心医院（CDP与HA）、承德法院两地三中心（数据实时集中灾备）等。

➤ 崔立达，英方华北区技术经理，《灾备四大解决方案及英方产品介绍》

顺应云和大数据的灾备技术是英方在灾备行业的特征优势之一，在基于主机内核级的I/O复制技术基础上，英方拥有i2COOPY（数据实时灾备）、i2CDP（持续数据保护）、i2Move（在线热迁移）、i2Availability（应用高可用）、i2Distributor（数据分发）等业内领先的解决方案，与此同时，i2Active和i2NAS也已经享誉业界。

在谈到技术方案时，崔立达提到英方新整合的四大解决方案，并且用了12个字总结了这四大方案的特点：全面覆盖、技术领先、安全可靠。

➤ 李晓明，河北电信政企部解决方案经理，《中国电信天翼云》

英方地区合作伙伴河北电信政企部解决方案经理李晓明作为受邀嘉宾，分别向大家介绍了中国电信天翼云的资源实力、天翼云3.0基础产品总览、优势产品-云网融合、优势产品-全网云CDN、优势产品-对象存储及可信赖的“五星”安全服务等重磅内容。

➤ 程权，英方产品营销总监，《英方云灾备产品介绍》

更适合云计算的灾备服务，作为云灾备领域的执牛耳者，英方在云迁移、云备份、云高可用、云共享等领域一直持续创新。程权在演讲时提到：“英方首次提出了“Hub”的云灾备产品理念，Hub不是具体指某一款产品，而是英方云的基础服务理念，将英方云i2yun.com比喻成在本地与云、云与云之间搭建一个连接器。”

英方云灾备即服务(DR-as-a-Service)秉承“hub”的产品理解，为企业提供面向云端的数据异地备份/容灾、恢复，系统迁移，业务高可用等服务，帮助企业避免因关键数据丢失及业务中断所造成的巨大损失。云灾备产品及服务价格适合不同规模的企业成本投入。

在现场，他还重点介绍了灾备的云化趋势、使用方式及资费、英方云灾备产品和解决方案。其中，四大核心云灾备产品分别指云迁移 i2Migration、云备份 i2CopyDataManagement、云容灾i2Disaster Recovery和云备享i2RecoveryShare。

总结：《诗经·大雅·文王》有云，周虽旧邦，其命维新。在灾备这个传统又焕发新的生命力的IT行业，英方正在不断通过推陈出新，以全新的技术方案服务用户的数据保护和管理需求，并且这种创新的战略思想也将及时同步到全国各地区的合作伙伴，与大家一起同心、同行、同享，一起“翼”往开来。

 

 

 

作者：Kate 来源：son-video
Lyngdorf TDAI-1120拥有丰富的连接方式，通过AirPlay 2认证并内置Chromecast，Lyngdorf TDAI-1120可以轻松地从智能手机、平板电脑或计算机无线传输音乐。兼容Spotify Connect，拥有网络收音机功能，通过Roon Ready认证，它既可以播放存储在USB接口的U盘或硬盘中的高清音乐文件，也可以访问本地局域网中共享的串流媒体文件。当然，它的领先功能还有无线蓝牙连接，以及兼容CEC的HDMI ARC接口，用于接驳4K/8K超高清电视。

Lyngdorf TDAI-1120在8欧姆下可以提供2 x 60W的输出功率，4欧姆下翻倍至120W。因此，它可以较为完善地驱动市场上绝大多数紧凑型扬声器以及部分落地式扬声器。

值得一提的是，TDAI-1120内置了Lyngdorf 专利RoomPerfect声学校正技术。它配有麦克风和支架，可让用户根据房间的声学特性校准扬声器，从而呈现更为精准的声音。

关于品牌

Peter Lyngdorf于1975年以音频设备经销商的身份开始了他作为发烧友企业家的职业生涯，之后于1980年建立了自己的连锁店，名为HiFi Klubben。专门销售高保真音响和配套视频显示设备，目前，商店网络已扩展到丹麦、挪威、瑞典、荷兰和德国。

1983年，Peter Lyngdorf 创立了DALI（Danish Audiophile Loudspeaker Industries），其目标是设计能够以具有竞争力的价格提供自然和忠实声音的扬声器和放大器。DALI公司很快就取得了成功，其品牌影响力也在高保真音响界声名鹊起。

对美国品牌Snell Acoustics（1989年7月至1996年9月完全由 Lyngdorf 拥有）和NAD Electronics（1991年10月至1997年5月完全由 Lyngdorf 拥有）的收购让Peter Lyngdorf 意识到探索音频技术极限的必要性。因此，由Snell Acoustics的创始人Kevin Voecks开发的声学校正技术在1992年的消费电子展上展出。1997年对丹麦初创公司Toccata Technology的投资，即EQUIBIT技术的创造者，让全数字放大器的开发迎来了最辉煌的千禧年。

 

2005 年创建Lyngdorf公司，致力于将最有效的发烧友声音校正系统集成到其数字放大器中。目标是借助数字信号处理 (DSP) 技术，通过测量扬声器所在房间的声学特性，从而获得当前使用环境中的最佳声音效果。

可以说Lyngdorf RoomPerfect声学校正技术是专为在未经声学优化的房间内聆听音乐，或声学处理并不理想的发烧友而设计。我们今天评测的 Lyngdorf TDAI-1120多功能放大器就是采用了这种技术，也是Lyngdorf目前最具关注的一款放大器产品。

 

包装和配件

Lyngdorf TDAI-1120随机附带电源线、用户手册、快速入门指南和用于扬声器声学校准的麦克风。声学校准套装中还带有一根8米长的XLR连接线和一个伸缩支架。

虽然遥控器并不是随机配备，但它在移动端的APP控制程序可以很方便地进行所有功能设置及调整。

 

设计

TDAI-1120放大器非常紧凑，只有30厘米宽、10厘米高和26厘米深。它的金属机身采用哑光黑色涂层，简洁的前面板分为两部分：右侧是控制界面，带有电源/待机按钮、信号源选择和音量电位器。左侧是功能显示屏，黑色背景上使用白色图文和字符。

 

屏幕仅显示选定的源，音量电平由音量旋钮周围的发光环指示。在移动端APP控制程序中可以清楚地看到音量级别。

功能

TDAI-1120兼容多种无线音频流协议，无论是通过有线以太网还是WiFi连接到本地网络，使其拥有非常广泛的功能性。首先，它支持Spotify Connect ，作为一种常见的在线流媒体音乐服务平台，它的使用便捷，音质出色，一旦曲目或播放列表开始播放，智能手机就可以退出软件。即使关闭手机，播放也会继续。

 

这款Lyngdorf放大器还包括一个Chromecast模块，它允许用户从智能手机或Android平板电脑以网络串流的形式传输任何音频应用程序。因此支持Deezer、Qobuz、Tidal、Amazon Music 以及发烧友们喜欢的网络电台。启动相关应用程序，点击屏幕右上角的Google Cast符号，然后选择Lyngdorf放大器作为您的播放设备，即可播放所需的节目。

 

该功能同样支持iPhone手机和iPad，此外，TDAI-1120还兼容Apple AirPlay 2。

 

Lyngdorf放大器支持Chromecast和AirPlay 2协议，还允许将集成到一个多房间音频系统中，该系统由兼容的无线扬声器和放大器组成。

 

再加上Roon Ready认证、USB设备上和通过本地网络 (DLNA/UPnP)的高分辨率音频播放以及蓝牙连接，TDAI-1120绝对是一款连接功能最丰富的功放产品之一。

接口

Lyngdorf TDAI-1120配备了4个数字输入（2个同轴和 2个光纤）、一个RCA模拟输入，以及一个集成RIAA前置放大器的唱机输入。对于拥有一个或多个模拟和数字音频源的用户来说，可以将他们全部连接至TDAI-1120。ARC功能的HDMI接口，用于接驳4K/8K超高清电视。在这种情况下，务必确保电视的音频输出设置为 PCM（放大器不解码 Dolby Digital Plus 或其他影院格式）。它的HDMI CEC协议支持允许用户使用电视遥控器控制播放音量。

RoomPerfect

TDAI-1120放大器的主要优势之一是RoomPerfect房间校准系统，它为用户提供精确的房间声学校正效果。使用随机附带的麦克风，按软件要求在听音室的多个点位进行测量。然后，放大器会自动定义声音的均衡曲线，补偿所需频率范围内的电平差异。

RoomPerfect3技术由一群声学工程师在Peter Lyngdorf的指导下开发，经过二十多年的音频研发才得以完善。这种智能校准系统可识别扬声器的声音特性，并对安装扬声器的房间的声学效果进行特定测量。然后，它会对信号进行校正，让用户享受完美适应听音室的形状、大小和声学特性的声音。同时，扬声器的音质并不受到影响。

RoomPerfect的开发旨在实现高保真度的最佳音乐再现，这是一个比家庭影院要求更高的领域。RoomPerfect系统的独特之处在于它保留了扬声器的本底音色，而不是根据房间声学校正系统规定的目标曲线来改变它。这意味着RoomPerfect的工作方式不同于其他校准解决方案。

RoomPerfect应用程序为用户在房间内放置扬声器时提供了一定的自由度。例如，如果它们靠墙放置，低音将被墙壁物理放大。RoomPerfect可最大程度地纠正这些频率响应缺陷。

Lyngdorf TDAI-1120 规格参数

额定功率：
– 2 x 120W RMS（4 欧姆）
– 2 x 60W RMS（8 欧姆）

最大输出电流：30A

音频参数
频率响应：±0,5dB 从 20 到 20,000Hz
总谐波失真：从 20 到 20,000Hz 最大 0.05%
THD-N 1w/8 欧姆：0.04%
THD-N 1w/4 欧姆：0.04%

产品特点

• RoomPerfect
• 预设均衡器
• ICC（样本间剪切校正）
• 32个可调通道，使用多达8个具有可调增益和Q值的滤波器
• 媒体播放器
• 网络电台 (vTuner)
• Spotify
• Roon ready
• 内置 Chromecast

 

DLNA 支持 (uPnP/DLNA)：
– AAC（320 kbps，最大 44.1kHz）
– AIFF（384kHz，最大 16 位）
– ALAC（192kHz，最大 24 位）
– FLAC（192kHz，最大 24 位）
– MP3 （320 kbps，48kHz 和 VBR，最大 48kHz）
– Ogg vorbis（最大 192kHz）
– Wav（192kHz，最大 32 位）
– WMA

AirPlay 2
蓝牙
本地文件播放（USB）
无线连接
蓝牙连接
无线网络 (802.11n)

接口

• 2 x同轴数字输入（异步，≤192kHz/24 位）
• 2 x光学数字输入（异步，≤96 kHz/24 位）
• 1 x HDMI (TV ARC)
• 1 x唱机输入 (RIAA / 47kOhms 100pF)
• 1 x 模拟 RCA 输入（最大电平：4.0V = 0dBFS）
• 1个用于 RoomPerfect 校准的麦克风输入 (XLR)
• 1 x立体声模拟 RCA 输入（75ohm-最大输出电平 4 Vrms）
   

配件

• RoomPerfect 麦克风
• 伸缩话筒架
• 麦克风线（8米）

规格
尺寸（高 x 宽 x 深）：101 x 300 x 260 毫米（包含接线端子）
重量：8公斤
表面处理：哑光黑

配置

在评测中，与Lyngdorf TDAI-1120搭配的是Jean-Marie Reynaud Lunna落地式扬声器，使用带有香蕉头的NorStone Arran MC音箱线连接。信号源是Pioneer UDP-LX500 4K蓝光播放器通过RCA连接至TDAI-1120。

还可以使用有线以太网或WiFi将TDAI-1120放大器连接到本地网络。当选择有线连接时，Lyngdorf 应用程序会在打开时立即检测到放大器，并可立即用于流媒体、音量控制和各种设置。

如果您选择通过WiFi连接到本地网络，则需要在移动设备（手机、平板电脑）中进行配置。如使用 iPhone或iPad，按住功放上的源/静音按钮约5秒钟，直到WiFi符号缓慢闪烁。然后可以在iPhone或iPad的WiFi菜单中检测到TDAI-1120。选择后，只需按照屏幕上的说明进行操作，它就会自动配置。片刻之后，它将能够访问与iPhone或iPad相同的本地网络。

 

应用程序/网络界面

Lyngdorf应用程序提供对音量设置、音源选择和优化声音的均衡配置文件列表的访问，以及音量设置和源选择。访问更多高级设置并执行RoomPerfect校准，此时需要转到放大器的Web界面，通过单击应用程序主屏幕左上角的齿轮并选择“在浏览器中打开设备”来访问该界面。

Web界面提供了丰富的音频设置，并且支持重命名输入以及启用或禁用HDMI端口上的CEC协议等。

 

 

 

扬声器校准

对于第一次测量，麦克风应放置在听者的位置（皇帝位）并指向扬声器。然后，RoomPerfect 系统将尽可能地评估和保留扬声器的性能，而不是对其进行修改以获得由校正系统确定的声音。测量期间，扬声器会播放一系列声音信号并由麦克风接收。

 

RoomPerfect软件会对所使用的房间进行声学评估。因此需要多次测量。它是通过将麦克风放置在房间的不同位置和不同的高度来实现，如果系统位于客厅，则不仅限于听众区域。软件则会创建一个房间的三维地图，每次将麦克风放置在不同的位置时，该地图都会变得更加精确。在应用程序中，“房间数据”百分比随着每次新测量而增加。应用程序中可以看到百分比数值的增长，以达到可以保存的状态。

 

软件可以保存多个聆听位置（皇帝位）计算结果，并且能够随时切换已经保存的数据，以便始终获得最佳声音。

 

 

 

实际听感

无需任何校准的情况下，TDAI-1120即展现出优美的音乐性。它把音乐原本的节奏传递给听者。声场的范围令人印象深刻，出色的立体声效果让我们直接沉浸在音乐的中心。

数字放大器很好地控制了庞大且反应灵敏的低频，它在整个频率范围内均匀地分配能量。乐器听起来很准确，人声表现得也很好。

通过RoomPerfect校准扬声器后，聆听体验的真实感、生动感和宁静感得到了显著改善。声场变得清晰自然，一切都显得更加“明显”和“真实”。低频既丰富又有生机。似乎从人声中揭开了一层薄纱。铙钹听起来更加生动自然。艺术家和乐器之间的亲昵感更加强烈，似乎就在我们面前。

当在应用程序中停用 RoomPerfect 校准，再实时比较差异时，这一点变得更加明显。起初给我们留下深刻印象的声音突然变得不那么丰富和生动了。太离奇了！

例如，在 Melody Gardot 的曲目“From Paris With Love”（Sunset in the Blue – 2020 – Qobuz – Flac 24/96）中，曲目的小提琴更加清晰流畅。可以很容易地识别被拨动的竖琴的每一根弦。铙钹更加细腻和精确。低频被更好地描绘，更丰富并且具有更大的幅度。总的来说，声音更宽敞，一切都更清晰，音乐似乎有更多的呼吸空间。

Balthazar 的“地堡”（Thin Walls – 2015 – Qobuz – 24/44.1）也是如此，一旦激活 RoomPerfect 校正，音乐就会像泉水一般自由地喷涌而来。人声、鼓、贝斯和合成器的清晰度明显提高。音乐也变得更加通透自然，一些之前可能听起来有点混乱的部分也得到了充分的修正。

通过消除或纠正室内不需要的共振和其他声学效果，RoomPerfect 技术恢复了声音原有的平衡、平静、细腻和清晰。

与其他器材的对比

NAD M10

在功能方面，NAD和Lyngdorf放大器几乎不相上下。绝大多数流媒体服务都可以访问，无论是NAD的BluOS应用程序，还是通过Lyngdorf的AirPlay或Chromecast直接访问流媒体应用程序。此外，两款机型都可以添加到多房间音频系统中。

在接口方面，两款放大器也几乎，都可以让用户享受多种模拟和数字信号源，包括HDMI ARC 端口连接电视。

NAD M10放大器的特点是非常紧凑的尺寸和大尺寸彩色触摸屏。它的高输出功率和令人信服的声场，以及提供的充沛能量和音乐质感能力，在我们的测试中留下了深刻的印象。事实证明，Dirac Live声学校正可以有效降低我们测试房间中的低频助波。

售价更贵的NAD M10提供更强大的放大功能，可以为要求非常高的扬声器提供驱动能力，并拥有口碑不错的BluOS应用程序和服务。

Lyngdorf TDAI-1120 放大器虽然没有NAD M10体积紧凑，但依然非常小巧，并且外观设计时尚简约。但它最大的优点是将音乐真实地呈现在听众面前。声场在水平和垂直方向都拥有不错的延伸，RoomPerfect校准提供更自然的声音和更好的清晰度。在这方面，它比NAD更高效，并且在启用RoomPerfect功能的情况下它提供了这个价格范围内无与伦比的音乐细节和透明度。

Naim Uniti Atom

Naim Uniti Atom 有一个大的彩色屏幕，但没有 NAD 的触摸屏功能，因为它拥有一个较大的旋钮控制键。功能和接口部分与Lyngdorf TDAI-1120类似，前提是选择带有 HDMI ARC 连接器的Atom版本，这需要额外支付 250 欧元……

虽然Uniti Atom表面上看上并不强大，但在实际聆听中，Naim能够为大型落地音箱提供充足的能量和控制力。遗憾的是，它并没有房间声学修正功能，这方面与在Lyngdorf 放大器相差甚远。

结论

无论是视觉上还是在音乐的表现上，Lyngdorf TDAI-1120并不是那种过分华丽的放大器。它的设计简单且严谨，而非常准确和宁静的方式再现的音乐是它的特点所在。

在校准扬声器后特点更加明显。RoomPerfect 技术不会改变其原有音色，只是恢复因房间声学问题而丢失的柔和度和清晰度。使用Lyngdorf TDAI-1120，音乐以完美的透明度恢复其自然的活力、能量和平衡。

人们常说，最好的电子产品和最好的扬声器是那些为音乐而腾出空间的产品。这正是我们在聆听 Lyngdorf TDAI-1120 放大器和 Jean-Marie Reynaud Lunna 落地式扬声器时的感受。

凭借 Lyngdorf TDAI-1120，这家丹麦制造商以紧凑而优雅的形式提供了我们对当今高端多功能串流放大器的所有期望：强劲的驱动力、丰富的连接方式和功能。同时搭载强大的扬声器校准系统RoomPerfect，专为优化高保真聆听而设计。你还想要什么呢？

优点：

• 易用性
• 优雅精致的外观
• 透明、丰富和平衡的声音
• 极其强大的 RoomPerfect 校准

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1983年美国Mullis首先提出核酸体外扩增设想，1985年由其发明了聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR），意味着PCR技术的诞生。1988年，Saiki等人从Thermus aquaticm分离出了耐热型DNA 聚合酶，即Taq DNA聚合酶，成功完成了DNA的自动扩增，使PCR变成一种便利的、普遍的实用分子生物学技术。

 

 

但随着常规PCR技术在分子生物学各个领域的广泛应用，样本量少、样本珍贵、非特异性扩增等现象经常出现。造成非特异性扩增的原因有很多：普通的Taq DNA 聚合酶的最适温度是72℃，此时酶的活性最佳，低于此温度，酶有较弱活性，于是DNA聚合酶低温下具有活性而引起的错误引导靶标延伸和引物二聚体形成；使用热启动高保真酶时也会出现非特异性扩增，主要跟PCR的条件（Mg2+、退火温度、循环数等）有关。非特异性会造成目标扩增子产量低；目标扩增子的灵敏度下降；下游应用效果不佳等。

 

今天我们来说说如何能成功扩增我们需要的目的片段。

 

一、直接PCR

 

是指直接从样品中扩增目标DNA，无需进行核酸分离纯化。

 

直接PCR中，在高温变性阶段，诸如细胞、组织等材料在特殊的缓冲液中被裂解，释放出DNA。因此这种方法简化了实验流程，减少了动手操作时间，同时可避免纯化过程中DNA的损失。今天分子实验室中所采用的菌落PCR鉴定就是直接PCR法的最直接的体现。可对直接样品简单处理或者稀释即可进行PCR反应。

 

二、梯度PCR

 

梯度PCR与降落PCR都是对反应体系中的退火温度进行优化，但两者在原理上有所不同。

 

梯度PCR是指在退火温度不太明确时，为了找到最优退火温度，在一台PCR仪上同时做多管PCR（需要在支持设置梯度退火温度的PCR仪），每一管放在仪器内不同列（有的是不同行）上，分别进行PCR（如50-60℃可以分6管，分别50℃，52℃，54℃，56℃，58℃，60℃），最终找到最合适的退火温度，并进一步以此退火温度进行普通PCR扩增。

He, Lingjuan, et al. "Genetic lineage tracing of resident stem cells by DeaLT". Nature protocols 13.10 (2018):2217-2246.

 

三、降落PCR

 

PCR反应中许多成分，如引物、模板、Mg2+、dNTPs等均会导致实验结果的不准确，针对复杂的基因组DNA模板，普通PCR往往存在非特异性扩增，得不到需要的理想产物。为了解决PCR非特异性扩增的问题，Don等人于1991年发明了降落PCR（touchdown PCR，TD-PCR）技术。

 

与温度梯度PCR相比，降落PCR更有优势，因为采用梯度PCR选择合适的退火温度时需要多次反应或多管反应，并且即使通过多次试验找到最佳的退火温度后，在更换其它的PCR仪进行同样的扩增时，最适的退火温度也有可能发生改变，需要重新进行最佳温度的摸索。而降落PCR只需一次反应就可以获得很好的扩增效果，避免了对每对引物进行最佳复性温度的优化和测定工作，并且降落PCR在很大程度上削弱了仪器性能对扩增效果的制约。

 

原理

PCR反应中退火温度会对扩增结果产生影响，随着退火温度的升高，扩增特异性会变好，同时扩增效率会变低。降落PCR一开始先用高温扩增，可得到特异性扩增产物；待目的基因的丰度上升后，降低扩增的温度，可提高扩增的效率。当退火温度降到非特异扩增发生的水平时，特异产物会有一个几何级数的优势，在剩余反应中非特异的位点由于丰度低无法和特异位点竞争，从而产生单一的占主导地位的扩增产物。

 

退火温度设置

通常降落PCR的退火温度范围可跨越15℃，从高于Tm值几度到低于其10℃左右，在每个温度上循环1-2个周期，然后在较低的退火温度上循环10个周期左右。

 

降落PCR应用

降落PCR适用于经常更换引物的实验，在不知道Tm值，同时不想很麻烦的找出最佳Tm值的情况下，使用降落PCR可以快速、特异的得到目的扩增片段。现在很多PCR仪具有设置降落PCR的程序，降落PCR在研究领域中已得到了广泛的应用。

 

注意事项

降落PCR虽然有一定的优势，但它并非万能，降落PCR只能做到“锦上添花”，即能看见主带，但是存在杂带，可以利用降落PCR进行优化，但是如果连主带也看不见，只有杂带，那么用降落PCR也不会有很好的效果。

 

四、巢式PCR

 

巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部，特异性的扩增位于首轮PCR产物内的DNA片段。

 

优势

如果第一次扩增产生了错误片断，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低。因此，巢式PCR的扩增非常特异。

 

实验步骤

第一步：第一对绿色引物结合到DNA模板上，同时由于特异性不够，也可能结合到其他具有相似结合位点的片段上并扩增产物。

第二步：使用第二对黄色引物结合到第一步扩增的目的片段上进行第二轮扩增。由于第二对引物位于第一步PCR产物内部，而非目的片断包含两套引物结合位点的可能性极小，因此第二套引物不可能扩增非目的片断。这种巢式PCR扩增确保第二轮PCR产物几乎或者完全没有引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染。

 

最后祝愿大家新的学期实验顺利，文章接收，PCR势如破竹！

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